जर्मन चिकित्सक और वैज्ञानिक रॉबर्ट कोच (1843-1910) को तपेदिक के खिलाफ उनके सूक्ष्मजीवविज्ञानी कार्य के लिए नोबेल पुरस्कार मिला। उन्होंने सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान के लिए कई मौलिक तरीके भी बनाए, जिनमें से कुछ का उपयोग आज भी किया जाता है।

जीवन भर का काम

19वीं सदी के अंत में, यूरोप में सभी मध्यम आयु वर्ग के लगभग एक तिहाई वयस्कों की तपेदिक से मृत्यु हो गई। उस समय के डॉक्टरों और वैज्ञानिकों ने इसका इलाज ढूंढने के लिए कई प्रयास किए। कोच रॉबर्ट कोई अपवाद नहीं थे; इस गंभीर बीमारी के खिलाफ लड़ाई उनका मिशन, उनके पूरे जीवन का काम बन गई। इस बीमारी की पहचान और संभावित उपचार में भारी प्रगति करने के बावजूद, यहां तक ​​​​कि इस काम के लिए चिकित्सा में नोबेल पुरस्कार प्राप्त करने के बावजूद, वैज्ञानिक ने कभी भी अनुसंधान विधियों में सुधार करना बंद नहीं किया, जिसका संपूर्ण सूक्ष्म जीव विज्ञान पर बड़ा प्रभाव पड़ा।

युवा और पेशे की पसंद

भावी वैज्ञानिक के माता-पिता गरीब खनिक थे जो इस बात से आश्चर्यचकित थे कि भाग्य ने उन्हें एक सक्षम लड़के को क्या दिया था। 1843 में क्लॉस्टहल (जर्मनी) में जन्मे हेनरिक हरमन रॉबर्ट कोच बचपन में एक सच्चे प्रतिभाशाली बालक थे। पाँच साल की उम्र से ही वह समाचार पत्र पढ़ने लगे थे, और थोड़ी देर बाद उन्हें शास्त्रीय साहित्य में रुचि हो गई और वह शतरंज के विशेषज्ञ थे। विज्ञान में मेरी रुचि हाई स्कूल में शुरू हुई, जहाँ मैंने जीव विज्ञान को अपने पसंदीदा विषय के रूप में चुना।

1866 में, 23 वर्ष की आयु में, हेनरिक रॉबर्ट कोच ने एम.डी. की डिग्री प्राप्त की और अगला दशक विभिन्न अस्पतालों और सरकारी वैज्ञानिक समाजों में एक चिकित्सक के रूप में काम करते हुए बिताया। 1876 ​​में, उन्होंने एंथ्रेक्स रोग पर अपना प्रमुख शोध प्रकाशित किया, जिससे उन्हें व्यापक प्रसिद्धि मिली। कुछ साल बाद उन्हें स्वास्थ्य ब्यूरो का सलाहकार नियुक्त किया गया, जहाँ उन्होंने अपना अधिकांश समय तपेदिक से संबंधित समस्याओं से निपटने में बिताया।

तपेदिक का कारण निर्धारित करना

आधुनिक चिकित्सा अधिकांश बीमारियों के कई कारण जानती है। जिस समय कोच रॉबर्ट रहते थे, यह ज्ञान इतना सामान्य नहीं था। वैज्ञानिक की पहली महत्वपूर्ण खोजों में से एक माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस की पहचान थी, जो इस घातक बीमारी का कारण बनता है। रॉबर्ट कोच ने संक्रमण के कारणों का अध्ययन करते हुए, तीन संक्रमित जानवरों: बंदरों, मवेशियों और मनुष्यों में से एक की सामग्री से जानबूझकर गिनी सूअरों को संक्रमित किया। परिणामस्वरूप, यह पाया गया कि संक्रमित सूअरों के जीवाणु उन जीवाणुओं के समान थे जिनसे वे संक्रमित हुए थे, संक्रमण के स्रोत की परवाह किए बिना।

कोच की अभिधारणाएँ

रॉबर्ट कोच ने सूक्ष्म जीव विज्ञान में क्या योगदान दिया? सबसे प्रभावशाली तरीकों में से एक यह प्रस्ताव था कि किसी बीमारी के प्रेरक एजेंट की पहचान उच्च स्तर के आत्मविश्वास के साथ की जा सकती है यदि चार शर्तें पूरी होती हैं, जिसे बाद में कोच के अभिधारणाओं के रूप में जाना जाने लगा। वे यहाँ हैं:

1. सूक्ष्मजीव को उन सभी जीवों में रोग उत्पन्न करना चाहिए जिनमें यह प्रचुर मात्रा में मौजूद है, इसलिए उन्हें असंक्रमित जीवों में मौजूद नहीं होना चाहिए।
2. संदिग्ध सूक्ष्म जीव को अलग किया जाना चाहिए और उसके शुद्ध रूप में उगाया जाना चाहिए।
3. सूक्ष्म जीव के पुनरुत्पादन से पहले से असंक्रमित जीवों में रोग उत्पन्न होना चाहिए।
4. संदिग्ध सूक्ष्म जीव को परीक्षण जीव से पुनः अलग किया जाना चाहिए, शुद्ध रूप में विकसित किया जाना चाहिए, और मूल रूप से पृथक सूक्ष्म जीव के समान होना चाहिए।

जीवाणु विज्ञान और सूक्ष्म जीव विज्ञान के संस्थापक

जर्मन चिकित्सक रॉबर्ट कोच ने जिन बीमारियों (1876 में एंथ्रेक्स और 1882 में तपेदिक) का अध्ययन किया, उनमें 1883 में हैजा भी था। 1905 में, वैज्ञानिक को फिजियोलॉजी या मेडिसिन में नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया था। मेडिकल छात्र रहते हुए, हेनरिक हरमन रॉबर्ट कोच को पैथोलॉजी और संक्रामक रोगों में बहुत रुचि थी। एक डॉक्टर के रूप में, उन्होंने पूरे जर्मनी के कई छोटे शहरों में काम किया, और फ्रेंको-प्रशिया युद्ध (1870-1872) के दौरान उन्होंने एक सैन्य सर्जन के रूप में स्वेच्छा से मोर्चे पर काम किया।

बाद में उन्हें एक स्थानीय चिकित्सा कार्यकर्ता के रूप में नियुक्त किया गया, जिसकी मुख्य ज़िम्मेदारी संक्रामक जीवाणु रोगों के प्रसार का अध्ययन करना था। चिकित्सा में जैव प्रौद्योगिकी का अनुप्रयोग अभी भी संक्रामक रोगों के कारणों का दस्तावेजीकरण करने के लिए कोच के सिद्धांतों पर बहुत अधिक निर्भर करता है। महान वैज्ञानिक की मृत्यु 1910 में ब्लैक फॉरेस्ट क्षेत्र (जर्मनी) में हुई, वह 66 वर्ष के थे।

एंथ्रेक्स अनुसंधान

जिस समय रॉबर्ट कोच रहते थे, वोलस्टीन क्षेत्र में खेत जानवरों के बीच एंथ्रेक्स व्यापक था। उस समय वैज्ञानिक के पास कोई वैज्ञानिक उपकरण नहीं था, पुस्तकालय और अन्य वैज्ञानिकों के साथ संपर्क दुर्गम थे। हालाँकि, इससे वह नहीं रुके और उन्होंने इस बीमारी का अध्ययन करना शुरू कर दिया। उनकी प्रयोगशाला एक 4-कमरे वाला अपार्टमेंट था, जो उनका घर था, और उनका मुख्य उपकरण एक माइक्रोस्कोप था, जो उनकी पत्नी से एक उपहार था।

पोलेंडर, रेयर और डेवाइन बेसिली को पहले एंथ्रेक्स के प्रेरक एजेंट के रूप में खोजा गया था, और कोच ने वैज्ञानिक रूप से यह साबित करने का प्रयास किया कि यह बेसिलस वास्तव में बीमारी का कारण था। उन्होंने बीमारी से मर चुके खेत के जानवरों की तिल्ली से ली गई एंथ्रेक्स बेसिली के साथ घर में बने लकड़ी के चिप्स का उपयोग करके चूहों को टीका लगाया। यह पता चला कि कृन्तकों की मृत्यु जानवरों के रक्त में संक्रमण के प्रवेश के परिणामस्वरूप हुई। इस तथ्य ने अन्य वैज्ञानिकों के निष्कर्षों की पुष्टि की जिन्होंने तर्क दिया कि यह रोग एंथ्रेक्स से पीड़ित जानवरों के रक्त के माध्यम से फैल सकता है।

एंथ्रेक्स बेसिली बाहरी वातावरण के प्रति प्रतिरोधी हैं

लेकिन इससे कोच संतुष्ट नहीं हुए. वह यह भी जानना चाहते थे कि क्या ये रोगाणु बीमारी का कारण बन सकते हैं यदि वे कभी किसी प्रकार के पशु जीव के संपर्क में नहीं रहे हों। इस समस्या को हल करने के लिए, उन्होंने बेसिली की शुद्ध संस्कृतियाँ प्राप्त कीं। रॉबर्ट कोच, उनका अध्ययन और तस्वीरें खींचते हुए, इस निष्कर्ष पर पहुंचे कि प्रतिकूल परिस्थितियों में वे बीजाणु पैदा करते हैं जो ऑक्सीजन की कमी और बैक्टीरिया के लिए नकारात्मक अन्य कारकों का सामना कर सकते हैं। इस प्रकार, वे बाहरी वातावरण में काफी लंबे समय तक जीवित रह सकते हैं, और जब उपयुक्त परिस्थितियाँ बनती हैं, तो उनकी जीवन शक्ति बहाल हो जाती है, बेसिली बीजाणुओं से निकलते हैं, जो जीवित जीवों को संक्रमित करने में सक्षम होते हैं जिसमें वे प्रवेश करते हैं, इस तथ्य के बावजूद कि वे पहले मौजूद थे उनसे कोई संपर्क नहीं.

रॉबर्ट कोच: खोजें और उपलब्धियाँ

एंथ्रेक्स पर अपने श्रमसाध्य कार्य के परिणामों को कोच ने ब्रेस्लाउ विश्वविद्यालय में वनस्पति विज्ञान के प्रोफेसर फर्डिनेंड कोहन को दिखाया, जिन्होंने इस खोज को देखने के लिए अपने सहयोगियों को इकट्ठा किया। उपस्थित लोगों में एनाटोमिकल पैथोलॉजी के प्रोफेसर कोनहेम भी थे। कोच के काम से हर कोई बहुत प्रभावित हुआ और 1876 में एक वनस्पति पत्रिका में इस विषय पर एक पेपर के प्रकाशन के बाद, कोच तुरंत प्रसिद्ध हो गए। हालाँकि, उन्होंने अगले चार वर्षों तक वोलस्टीन के लिए काम करना जारी रखा और इस अवधि के दौरान उन्होंने बैक्टीरिया की रिकॉर्डिंग, धुंधलापन और तस्वीरें खींचने के अपने तरीकों में सुधार किया।

बर्लिन में जीवन

बाद में, पहले से ही बर्लिन में, उन्होंने बैक्टीरियोलॉजिकल तरीकों में सुधार करना जारी रखा, साथ ही साथ नए तरीकों का आविष्कार किया - आलू जैसे ठोस मीडिया में शुद्ध बैक्टीरिया बढ़ाना। जिस क्षेत्र में रॉबर्ट कोच ने काम करना जारी रखा, सूक्ष्म जीव विज्ञान, हाल तक उनकी संकीर्ण विशेषता बनी रही। उन्होंने बैक्टीरिया को दागने के नए तरीके भी विकसित किए जिससे वे अधिक दृश्यमान हो गए और उनकी पहचान करने में मदद मिली। इस सभी कार्य का परिणाम उन तरीकों की शुरूआत है जिनके द्वारा रोगजनक बैक्टीरिया को अन्य जीवों से मुक्त, शुद्ध संस्कृति में आसानी से और आसानी से प्राप्त किया जा सकता है, और जिसके द्वारा उनका पता लगाया और पहचाना जा सकता है। बर्लिन पहुंचने के दो साल बाद, कोच ने तपेदिक बेसिलस की खोज की, साथ ही इसे शुद्ध रूप में उगाने की एक विधि भी खोजी।

हैजा से लड़ो

कोच अभी भी तपेदिक के खिलाफ काम करने में व्यस्त थे, जब 1883 में, उन्हें उस देश में हैजा के प्रकोप की जांच के लिए एक जर्मन आयोग के नेता के रूप में मिस्र भेजा गया था। यहां उन्होंने विब्रियो की खोज की, जो इस बीमारी का कारण बनता है, और जर्मनी में शुद्ध संस्कृतियां लेकर आए। उन्होंने भारत में भी इसी तरह का मुद्दा उठाया था। जीव विज्ञान और विब्रियो कॉलेरी के फैलने के तरीके के बारे में अपने ज्ञान के आधार पर, वैज्ञानिकों ने महामारी से निपटने के लिए नियम बनाए, जिन्हें 1893 में ड्रेसडेन में महान शक्तियों द्वारा अनुमोदित किया गया और नियंत्रण विधियों का आधार बनाया गया जो आज भी उपयोग किए जाते हैं।

उच्च पदों पर नियुक्ति

1885 में, रॉबर्ट कोच, जिनकी जीवनी एक छोटे शहर और एक गरीब परिवार से आती है, को बर्लिन विश्वविद्यालय में स्वच्छता का प्रोफेसर नियुक्त किया गया था। 1890 में उन्हें सर्जन जनरल नियुक्त किया गया, और 1891 में वे मेडिसिन संकाय के एमेरिटस प्रोफेसर और नए संक्रामक रोग संस्थान के निदेशक बन गए। इस अवधि के दौरान, कोच तपेदिक के खिलाफ लड़ाई में अपने काम पर लौट आए। उन्होंने माइकोबैक्टीरिया से बनी ट्यूबरकुलिन नामक दवा से इस बीमारी को रोकने की कोशिश की। दवा के दो संस्करण बनाए गए। जिनमें से पहले ने तुरंत महत्वपूर्ण विवाद पैदा कर दिया। दुर्भाग्य से, इस दवा की उपचार शक्ति को बहुत बढ़ा-चढ़ाकर पेश किया गया था, और इस पर रखी गई उम्मीदें उचित नहीं थीं। 1896 में कोच द्वारा नए ट्यूबरकुलिन (दूसरे संस्करण) की घोषणा की गई थी और इसका औषधीय महत्व भी निराशाजनक था, लेकिन फिर भी इससे नैदानिक ​​​​मूल्य के पदार्थों की खोज हुई।

और फिर प्लेग, मलेरिया, ट्रिपैनोसोमियासिस...

1896 में कोच ने रिंडरपेस्ट की उत्पत्ति का अध्ययन करने के लिए दक्षिण अफ्रीका की यात्रा की। इस तथ्य के बावजूद कि इस बीमारी का कारण पता नहीं चल सका है, प्रकोप अभी भी नियंत्रित है। इसके बाद भारत और अफ्रीका में मलेरिया, ब्लैकवॉटर फीवर, ट्रिपैनोसोमियासिस और रिंडरपेस्ट पर काम किया गया। इन बीमारियों पर उनकी टिप्पणियों का प्रकाशन 1898 में हुआ था। जर्मनी लौटने के तुरंत बाद, दुनिया भर में उनकी यात्राएँ जारी रहीं। इस बार यह इटली था, जहां उन्होंने मलेरिया पर सर रोनाल्ड रॉस के काम की पुष्टि की और मलेरिया के विभिन्न रूपों के एटियलजि और कुनैन के साथ उनके नियंत्रण पर उपयोगी काम किया।

सूक्ष्म जीव विज्ञान में योगदान: मानद पुरस्कार और पदक

अपने जीवन के इन अंतिम वर्षों के दौरान कोच इस निष्कर्ष पर पहुंचे कि मनुष्यों और मवेशियों में तपेदिक का कारण बनने वाले बेसिली एक समान नहीं हैं। 1901 में लंदन में तपेदिक के विरुद्ध अंतर्राष्ट्रीय मेडिकल कांग्रेस में उनके बयान पर बहुत विवाद हुआ, लेकिन अब पता चला है कि कोच का दृष्टिकोण सही था। टाइफस पर उनके काम से यह विचार आया कि यह बीमारी पीने के पानी की तुलना में एक व्यक्ति से दूसरे व्यक्ति में अधिक बार फैलती है, और इससे नए नियंत्रण उपाय सामने आए।

दिसंबर 1904 में, कोच को मवेशियों के बुखार का अध्ययन करने के लिए पूर्वी अफ्रीका भेजा गया, जहां उन्होंने न केवल बीमारी का, बल्कि रोगजनक बेबेसिया और ट्रिपैनोसोमा प्रजातियों और टिकबोर्न स्पाइरोचेटोसिस का भी महत्वपूर्ण अवलोकन किया। प्रोफेसर रॉबर्ट कोच को कई पुरस्कार और पदक, बर्लिन, वियना, नेपल्स, न्यूयॉर्क और अन्य में वैज्ञानिक समाजों और अकादमियों में मानद सदस्यता से सम्मानित किया गया। उन्हें जर्मन ऑर्डर ऑफ द क्राउन, ग्रैंड क्रॉस ऑफ द जर्मन ऑर्डर ऑफ द रेड ईगल से सम्मानित किया गया। कई देशों में, महान सूक्ष्म जीवविज्ञानी के सम्मान में स्मारक और स्मारक बनाए गए थे। डॉ. कोच की मृत्यु 27 मई, 1910 को बाडेन-बेडेन में हुई।

जर्मनी ने सदियों से कई नवीन वैज्ञानिक दिमाग पैदा किए हैं, जिनमें से एक अपने समय के महानतम वैज्ञानिकों में से एक रॉबर्ट हेनरिक हरमन कोच हैं, जिन्होंने जीवाणु विज्ञान के अध्ययन की नींव रखी और विभिन्न जीवाणु रोगों के कारणों और संभावित उपचारों को समझाने में मदद की।

वह एक निडर शोधकर्ता थे क्योंकि उन पर एंथ्रेक्स, तपेदिक और कई अन्य जैसी जीवन-घातक बीमारियों का अध्ययन करने के लिए अभूतपूर्व प्रयास करने का दायित्व था। इस विद्वान वैज्ञानिक ने आधुनिक प्रयोगशालाओं के निर्माण में भी महत्वपूर्ण भूमिका निभाई। रॉबर्ट कोच सिर्फ एक प्रतिभाशाली वैज्ञानिक नहीं थे, वह एक प्रतिभाशाली व्यक्ति थे, और अपने पूरे जीवन में उन्हें प्राप्त पुरस्कारों और पदकों की संख्या विश्व चिकित्सा विज्ञान में उनके योगदान का सबसे अच्छा प्रमाण है।

मिट्टी और अन्य प्राकृतिक सब्सट्रेट्स में व्यवहार्य सूक्ष्मजीवों की संख्या निर्धारित करने के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इसका उपयोग न केवल सूक्ष्मजीवों की संख्या को ध्यान में रखने की अनुमति देता है, बल्कि कालोनियों की आकृति विज्ञान के आधार पर उनकी विविधता का मूल्यांकन करने की भी अनुमति देता है।

मिट्टी के नमूने एक बाँझ चम्मच का उपयोग करके लिए जाते हैं, और अध्ययन उस दिन किया जाता है जिस दिन नमूने लिए जाते हैं। विधि का सार अध्ययन के तहत मिट्टी के नमूने को पेट्री डिश में घने माध्यम पर बोना और फिर विकसित कॉलोनियों की गिनती करना है। ऐसा माना जाता है कि प्रत्येक कॉलोनी एक कोशिका के प्रजनन का परिणाम है। काम तीन चरणों में किया जाता है: पतलापन तैयार करना, बर्तनों में बुआई करना, और विकसित कॉलोनियों की गिनती करना।

अध्ययन के तहत सब्सट्रेट में सूक्ष्मजीवों की अपेक्षित संख्या के आधार पर, निलंबन को पतला करके टीका लगाया जाता है। तनुकरण बाँझ नल के पानी या आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान में किया जाता है। प्रयोग के दौरान, एक निरंतर कमजोर पड़ने वाले कारक का उपयोग किया जाता है। अधिकतर, दशमलव तनुकरण किया जाता है।

विश्लेषण की जाने वाली मिट्टी का एक नमूना (1-10 ग्राम) 100 मिलीलीटर बाँझ पानी के साथ एक फ्लास्क में रखा जाता है और हिलाया जाता है। फिर परीक्षण सामग्री के 1 मिलीलीटर को एक बाँझ पिपेट के साथ 9 मिलीलीटर बाँझ पानी के साथ एक परखनली में स्थानांतरित करें। यदि परीक्षण सामग्री को पहले ही 100 बार पतला किया जा चुका है, तो 1:1000 का पतलापन प्राप्त होता है। इस तनुकरण के सस्पेंशन को एक पिपेट में लेकर और उसमें से निकालकर पूरी तरह मिलाया जाता है। फिर, उसी पिपेट के साथ, परिणामी तनुकरण का 1 मिलीलीटर लें और इसे दूसरी टेस्ट ट्यूब में स्थानांतरित करें - 1:10000 का तनुकरण प्राप्त होता है। इसके बाद के घोल को भी इसी तरह तैयार किया जाता है। तनुकरण की डिग्री नमूने में सूक्ष्मजीवों की अनुमानित संख्या से निर्धारित होती है: मूल सब्सट्रेट में जितने अधिक सूक्ष्मजीव होंगे, तनुकरण की संख्या उतनी ही अधिक होगी।

पेट्री डिश में अगर मीडिया पर टीकाकरण किया जाता है। सूक्ष्मजीवों की कुल संख्या निर्धारित करने के लिए, मांस-पेप्टोन या मछली-पेप्टोन अगर (एमपीए, आरपीए) का उपयोग किया जाता है; मिट्टी में कवक की सामग्री निर्धारित करने के लिए, वोर्ट अगर (एसए) का उपयोग किया जाता है; विभिन्न शारीरिक समूहों की संख्या निर्धारित करने के लिए और स्वच्छता-सूचक सूक्ष्मजीव, उपयुक्त पोषक माध्यम का उपयोग किया जाता है। अगर माध्यम को पानी के स्नान में पिघलाकर बाँझ पेट्री डिश में डाला जाता है, प्रत्येक 20-30 मिलीलीटर। जब तक आगर सख्त न हो जाए तब तक बर्तनों को क्षैतिज सतह पर छोड़ दिया जाता है। एक बाँझ पिपेट का उपयोग करके, पेट्री डिश में अगर प्लेट की सतह पर, पहले से अच्छी तरह से मिश्रित, उपयुक्त तनुकरण की एक निश्चित मात्रा (आमतौर पर 0.1-0.5 मिली) लागू करें। यह मात्रा एक बाँझ स्पैटुला के साथ माध्यम की सतह पर वितरित की जाती है। फिर इस स्पैटुला को दूसरे और तीसरे कप में माध्यम की पूरी सतह पर पारित किया जाता है, जहां इनोकुलम नहीं जोड़ा गया था (संपूर्ण टीकाकरण विधि)।

प्रत्येक तनुकरण से 4-6 समानांतर बीजारोपण किए जाते हैं। समान तनुकरण को समानांतर में टीका लगाते समय, आप एक बाँझ पिपेट और एक स्पैटुला का उपयोग कर सकते हैं। इनोक्यूलेटेड मीडिया वाले कपों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है, जिसे पहचाने जाने वाले जीवों के विकास के लिए अनुकूल तापमान पर समायोजित किया जाता है। खेती के दौरान बैक्टीरिया की गिनती 30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर तीन दिनों के बाद, कमरे के तापमान पर - सात दिनों के बाद की जाती है। खमीर और मशरूम की गिनती - 310 दिनों के बाद कमरे के तापमान पर (25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर, मशरूम के अवलोकन की अवधि को 2-3 दिनों तक कम किया जा सकता है)।

पेट्री डिश में उगाई गई कालोनियों की संख्या की गणना की जाती है और प्रति 1 ग्राम पर पुनर्गणना की जाती है। समानांतर बीजारोपण के परिणामों को संक्षेप में प्रस्तुत किया जाता है और इस तनुकरण से बीज बोने पर विकसित हुई कालोनियों की औसत संख्या की गणना की जाती है। पेट्री डिश खोले बिना कालोनियों की गिनती की जाती है।

विधि की सटीकता गिनती की गई कालोनियों की संख्या पर निर्भर करती है, न कि प्रतिकृतियों की संख्या पर। सबसे अच्छा प्रजनन वह माना जाता है जो ठोस पोषक माध्यम पर बोने पर 50 से 100 कालोनियों का उत्पादन करता है। यदि विकसित कॉलोनियों की संख्या 10 से कम है, तो इन परिणामों को खारिज कर दिया जाता है और मूल सब्सट्रेट में कोशिकाओं की संख्या की गणना करने के लिए उपयोग नहीं किया जाता है। यह वांछनीय है कि किसी दिए गए तनुकरण से बोए जाने पर गिनी गई कालोनियों की कुल संख्या कम से कम 300 हो।

मूल सब्सट्रेट के 1 ग्राम (1 मिली) में सूक्ष्मजीवों की संख्या की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है:

टी = ए एक्स बी एक्स सी / डी,

जहां टी 1 ग्राम में सूक्ष्मजीवों की संख्या है, ए गणना की गई कॉलोनियों की संख्या है, बी वह पतलापन है जिससे बीजारोपण किया गया था, सी 10 है (यदि 0.1 मिलीलीटर निलंबन व्यंजन पर बोया गया था), डी द्रव्यमान है विश्लेषण के लिए लिया गया सब्सट्रेट (मिट्टी)।

परिणामों का सांख्यिकीय प्रसंस्करण न्यूनतम तकनीकी त्रुटि के साथ ही संभव है, इसलिए सभी ऑपरेशन करते समय कप विधि को बहुत सफाई और सटीकता की आवश्यकता होती है। पिपेट और मीडिया को विदेशी सूक्ष्मजीवों द्वारा संदूषण से सावधानीपूर्वक बचाना आवश्यक है, क्योंकि गलती से डाली गई कोशिका परीक्षण निलंबन में सूक्ष्मजीवों की संख्या को कम कर सकती है। तनुकरण एवं बीजारोपण की तैयारी एक डिब्बे में की जानी चाहिए।

वर्णित विधि एरोबेस और ऐच्छिक अवायवीय जीवों की गिनती के लिए लागू है। सख्त अवायवीय जीवों को ध्यान में रखते हुए, पेट्री डिश को टीकाकरण के बाद अवायवीय परिस्थितियों में रखा जाता है।

मृदा सूक्ष्मजीवों के अध्ययन के लिए पारिस्थितिक तरीके

बैक्टीरिया को शुद्ध कल्चर के रूप में अलग करने की अपेक्षाकृत कम विधियाँ ज्ञात हैं। यह अक्सर ठोस कल्चर माध्यम पर अलग-अलग कोशिकाओं को अलग करके, स्ट्रीक प्लेटिंग विधि का उपयोग करके, या प्लेटों में थोड़ी मात्रा में तरल कल्चर डालकर किया जाता है ( सीमित तनुकरण विधि). हालाँकि, एक अलग कॉलोनी प्राप्त करना हमेशा संस्कृति की शुद्धता की गारंटी नहीं देता है, क्योंकि कॉलोनियाँ न केवल व्यक्तिगत कोशिकाओं से, बल्कि उनके समूहों से भी विकसित हो सकती हैं। यदि सूक्ष्मजीव बलगम बनाते हैं, तो अक्सर इसमें विदेशी रूप जुड़े होते हैं। शुद्धिकरण के लिए, गैर-चयनात्मक माध्यम (एनएसएम) का उपयोग करना बेहतर होता है, क्योंकि दूषित सूक्ष्मजीव इस पर बेहतर ढंग से विकसित होते हैं और उनका पता लगाना आसान होता है।

एक ठोस पोषक माध्यम पर पृथक कालोनियों को प्राप्त करना या तो एक स्पैटुला के साथ सूक्ष्मजीवों के निलंबन को छानकर प्राप्त किया जाता है ( कोच विधि), या बैक्टीरियोलॉजिकल लूप का उपयोग करना ( थकावट स्ट्रोक विधि). सूक्ष्मजीव कोशिकाओं के यांत्रिक पृथक्करण के परिणामस्वरूप, उनमें से प्रत्येक एक प्रकार के सूक्ष्म जीव की एक पृथक कॉलोनी को जन्म दे सकता है।

स्पैचुला से छानना (कोच विधि)निम्नलिखित अनुक्रम में उत्पादित:

1) संवर्धन संस्कृति की एक बूंद को एक बाँझ पिपेट के साथ डिश नंबर 1 में पोषक माध्यम की सतह पर लगाया जाता है और एक बाँझ स्पैटुला के साथ वितरित किया जाता है;

2) स्पैटुला को बाहर निकालें, कप को तुरंत बंद करें और स्पैटुला को बिना स्टरलाइज़ किए कप नंबर 2 में स्थानांतरित करें। माध्यम की पूरी सतह पर कल्चर के वितरण को स्पैटुला के उसी तरफ से छूकर अनुकरण करें जिसका उपयोग पहले नमूना वितरित करने के लिए किया गया था;

3) बिल्कुल वही क्रियाएं कप नंबर 3 में की जाती हैं, जिसके बाद स्पैटुला को निष्फल कर दिया जाता है;

4) बीज वाले बर्तनों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है और इष्टतम तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है।

एक निश्चित समय के बाद, कपों को थर्मोस्टेट से हटा दिया जाता है और सूक्ष्मजीवों की वृद्धि का अध्ययन किया जाता है। आमतौर पर, कप नंबर 1 में बैक्टीरिया की निरंतर वृद्धि देखी जाती है, और बाद के कपों में कॉलोनी देखी जाती है।

लूप छानना (ड्रेनिंग स्ट्रीक विधि)इसमें पेट्री डिश में अगर माध्यम की सतह पर एक संवर्धन संस्कृति से एक बैक्टीरियोलॉजिकल लूप बोना शामिल है। पहले चरण में, कल्चर के साथ एक लूप का उपयोग करके अगर माध्यम पर समानांतर स्ट्रोक की एक श्रृंखला लागू की जाती है (चित्र 4.2, ए). लूप को निष्फल किया जाता है, अगर माध्यम के असंक्रमित हिस्से पर ठंडा किया जाता है और पहले वाले के लंबवत दिशा में स्ट्रोक की एक श्रृंखला बनाई जाती है (चित्रा 4.2, बी). फिर लूप को फिर से स्टरलाइज़ किया जाता है, ठंडा किया जाता है और दिशा में स्ट्रोक लगाया जाता है में(चित्र 4.2), और अगली नसबंदी के बाद - दिशा में जी(चित्र 4.2)। कपों को थर्मोस्टेट में रखा जाता है और एक निश्चित समय के बाद परिणामों को ध्यान में रखा जाता है। आमतौर पर स्ट्रोक्स पर एऔर बीस्ट्रोक पर रहते हुए बड़ी संख्या में कॉलोनियां बढ़ती हैं (कभी-कभी निरंतर वृद्धि)। मेंऔर जीअलग-अलग कालोनियां बन जाती हैं।

चित्र 4.2 - पृथक कॉलोनी प्राप्त करने के लिए बैक्टीरिया की स्ट्रीक छानने की योजना

ठोस माध्यम में क्रमिक तनुकरण- प्लेटों को बोने की सबसे सरल विधि, जिसमें यह तथ्य शामिल है कि नमूने को बाँझ पिघले और ठंडे अगर के साथ एक टेस्ट ट्यूब में डालने के बाद, माध्यम को मिलाया जाता है, पेट्री डिश में डाला जाता है और सख्त होने दिया जाता है। अच्छी तरह से पृथक कालोनियों को प्राप्त करने के लिए, क्रमिक दस गुना तनुकरण की एक श्रृंखला तैयार करें और 1 मिलीलीटर नमूने सीधे कप में डालें, 15-20 मिलीलीटर पिघला हुआ अगर माध्यम डालें और कप को हिलाकर मिलाएं। कभी-कभी अलग-अलग कॉलोनियां आगर में डूब जाती हैं और उन्हें केवल यंत्रवत् ही हटाया जा सकता है। यह भी बुरा है कि बैक्टीरिया पिघले हुए अगर के तापमान पर कुछ समय वातावरण में बिताते हैं।

बैक्टीरिया की कुल संख्या निर्धारित करने के लिए कोच विधि का उपयोग किया जाता है। उपयुक्त तनुकरण से परीक्षण सामग्री का 1 मिलीलीटर एक खाली बाँझ पेट्री डिश में डाला जाता है और 10 - 15 मिलीलीटर पिघला हुआ और 45 0 सी एमपीए तक ठंडा किया जाता है, तरल के साथ मिलाया जाता है, डिश को मेज की सतह पर घुमाया जाता है।

फसल उगाने के बाद आगर की सतह और गहराई में उगी कालोनियों की गिनती की जाती है। ऐसा करने के लिए, कप को काली पृष्ठभूमि पर उल्टा रखा जाता है, प्रत्येक गिनती की गई कॉलोनी को कांच पर एक मार्कर से चिह्नित किया जाता है। केवल उन्हीं प्लेटों का मूल्यांकन किया गया जिन पर 30 से 300 कॉलोनियाँ विकसित हुईं। यदि एक प्लेट पर 300 से अधिक कॉलोनियां विकसित हो गई हैं, और विश्लेषण दोहराया नहीं जा सकता है, तो एक आवर्धक कांच और ग्रिड के साथ एक विशेष प्लेट का उपयोग करके मजबूत पार्श्व रोशनी के तहत कॉलोनियों को गिना जा सकता है।

कालोनियों की संख्या प्लेट पर विभिन्न स्थानों पर 1 सेमी 2 क्षेत्रफल वाले कम से कम 20 वर्गों में गिनी जाती है। प्रति 1 सेमी2 में कॉलोनियों की औसत संख्या की गणना की जाती है और डिश के क्षेत्रफल से गुणा किया जाता है।

कालोनियों की गिनती करते समय, एक विशेष जीवाणु गिनती उपकरण, पीएसबी, का उपयोग किया जा सकता है।

प्रत्येक डिश में कालोनियों की गिनती का परिणाम प्रति 1 मिलीलीटर (सेमी 3) या परीक्षण सामग्री के 1 ग्राम में बैक्टीरिया की संख्या है, जो तनुकरण को ध्यान में रखता है। जीवाणुओं की अंतिम संख्या को दो आसन्न तनुकरणों से टीकाकृत प्लेटों पर कालोनियों की गिनती के परिणामों के अंकगणितीय माध्य के रूप में लिया जाता है।

उदाहरण:तनुकरण 10 -1 - 250 कॉलोनियाँ, तनुकरण 10 -2 - 23 कॉलोनियाँ।

कुल बैक्टीरिया गिनती = 250 x 10 + 23 x 100/2 = 2400 सीएफयू/एमएल = 2.4 x 10 2 सीएफयू/एमएल (कॉलोनी बनाने वाली इकाइयां प्रति एमएल)।

शोध परिणाम को 2 - 3 महत्वपूर्ण अंकों तक पूर्णांकित किया जा सकता है।

अनुमापन विधि.

एसपीएम की संख्या निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है।

पहला चरण:सामग्री का समरूपीकरण. यदि आवश्यक हो, तो सूक्ष्मजीवों को तरल चरण में स्थानांतरित करने के लिए एक निलंबन तैयार करें।

दूसरा चरण:तनुकरणों की एक श्रृंखला तैयार करना।

तीसरा चरण:परीक्षण सामग्री की चयनित मात्रा (100, 10, 1 मिली) बोना और 1 मिली को तरल पोषक माध्यम में पतला करना। विधि की सटीकता बढ़ाने के लिए, प्रत्येक मात्रा को पोषक माध्यम के कई हिस्सों (दो-, तीन-, पांच-पंक्ति बुवाई) में समानांतर में टीका लगाया जा सकता है। इष्टतम तीन गुना पुनरावृत्ति (अपेक्षाकृत कम लागत पर पर्याप्त विश्वसनीयता) है।

चौथा चरण:तरल पोषक माध्यम पर विकास की उपस्थिति और सकारात्मक मात्रा से ठोस पोषक माध्यम पर बुआई को ध्यान में रखते हुए।

5वां चरण:ठोस पोषक माध्यम पर विकसित सूक्ष्मजीवों की पहचान। इस मामले में, सांस्कृतिक गुणों को ध्यान में रखा जाता है और, यदि आवश्यक हो, तो अतिरिक्त अध्ययन किए जाते हैं (टिनक्टोरियल, रूपात्मक, जैव रासायनिक और सीरोलॉजिकल गुणों का अध्ययन)।

यदि एकल-पंक्ति विधि का उपयोग किया जाता है, तो एक नियम के रूप में, परिणाम वांछित सूक्ष्मजीव के अनुमापांक के रूप में व्यक्त किया जाता है, जिसे सबसे छोटी मात्रा (उच्चतम कमजोर पड़ने) के रूप में लिया जाता है जिसमें यह अभी भी पाया गया था।

यदि एक बहु-पंक्ति विधि का उपयोग किया गया था, तो परिणाम विशेष तालिकाओं का उपयोग करके दर्ज किए जाते हैं जो वृद्धि देने वाले सकारात्मक वॉल्यूम के संयोजन के आधार पर टिटर या इंडेक्स (टीएनआई) निर्धारित करना संभव बनाते हैं।

एनिलिन रंगों के अभ्यास का परिचय

माइक्रोस्कोपी में विसर्जन प्रणाली और कंडेनसर का उपयोग

जैविक तरल पदार्थ और ठोस पोषक माध्यम पर खेती की एक विधि का विकास

भिन्नात्मक उपबीज पद्धति का विकास

एंथ्रेक्स, हैजा, तपेदिक और ट्यूबरकुलिन के प्रेरक एजेंट की खोज

लगभग उसी वर्ष, रॉबर्ट कोच (1843 - 1910) की अध्यक्षता में माइक्रोबायोलॉजिस्ट के जर्मन स्कूल का गठन किया गया और सफलतापूर्वक काम किया गया। कोच ने अपना शोध ऐसे समय में शुरू किया जब संक्रामक रोगों के एटियलजि में सूक्ष्मजीवों की भूमिका पर गंभीरता से सवाल उठाए जा रहे थे। इसे साबित करने के लिए, स्पष्ट मानदंडों की आवश्यकता थी, जो कोच द्वारा तैयार किए गए थे और इतिहास में "हेनले-कोच ट्रायड" के नाम से दर्ज हुए। त्रय का सार इस प्रकार था:

1) संदिग्ध माइक्रोबियल रोगज़नक़ का हमेशा किसी दिए गए रोग में ही पता लगाया जाना चाहिए, और इसे अन्य बीमारियों या स्वस्थ व्यक्तियों से अलग नहीं किया जाना चाहिए;

2) रोगजनक सूक्ष्म जीव को शुद्ध संस्कृति में अलग किया जाना चाहिए;

3) इस सूक्ष्म जीव की शुद्ध संस्कृति को मानव रोग के समान नैदानिक ​​​​और रोग संबंधी तस्वीर के साथ प्रयोगात्मक संक्रमित जानवरों में एक बीमारी का कारण बनना चाहिए।

अभ्यास से पता चला है कि सभी तीन बिंदु सापेक्ष महत्व के हैं, क्योंकि शुद्ध संस्कृति में किसी बीमारी के प्रेरक एजेंट को अलग करना और प्रायोगिक जानवरों में मनुष्यों की विशेषता वाली बीमारी का कारण बनना हमेशा संभव नहीं होता है। इसके अलावा, स्वस्थ लोगों में भी रोगज़नक़ पाए गए हैं, खासकर बीमारी के बाद। फिर भी, मेडिकल माइक्रोबायोलॉजी के विकास और गठन के शुरुआती चरणों में, जब कई सूक्ष्मजीव जो रोग से संबंधित नहीं थे, उन्हें रोगियों के शरीर से अलग कर दिया गया था, तो त्रय ने रोग के वास्तविक प्रेरक एजेंट की पहचान करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई थी। अपनी अवधारणा के आधार पर, कोच ने अंततः साबित कर दिया कि एंथ्रेक्स वाले जानवरों में पहले खोजा गया सूक्ष्मजीव ट्रायड की आवश्यकताओं को पूरा करता है और इस बीमारी का असली प्रेरक एजेंट है। रास्ते में, कोच ने एंथ्रेक्स बैक्टीरिया की बीजाणु बनाने की क्षमता स्थापित की।

कोच ने सूक्ष्मजीवों के अध्ययन के लिए बुनियादी तरीकों के विकास में एक महान भूमिका निभाई। इस प्रकार, उन्होंने ठोस पोषक मीडिया पर बैक्टीरिया की शुद्ध संस्कृतियों को अलग करने की विधि को सूक्ष्मजीवविज्ञानी अभ्यास में पेश किया, माइक्रोबियल कोशिकाओं को दागने के लिए एनिलिन रंगों का उपयोग करने वाले पहले व्यक्ति थे और उनके सूक्ष्म अध्ययन के लिए विसर्जन लेंस और माइक्रोफोटोग्राफ़ी का उपयोग किया।

1882 में, कोच ने साबित किया कि जिस सूक्ष्मजीव को उन्होंने अलग किया था वह तपेदिक का प्रेरक एजेंट था, जिसे बाद में कोच का बेसिलस नाम दिया गया था। 1883 में, कोच और उनके सहयोगियों ने हैजा के प्रेरक एजेंट - विब्रियो कोलेरा (कोच का विब्रियो) को अलग कर दिया।

1886 से, कोच ने अपना पूरा शोध तपेदिक के इलाज या रोकथाम में प्रभावी दवाओं की खोज के लिए समर्पित कर दिया है। इन अध्ययनों के दौरान, उन्होंने पहली तपेदिक रोधी दवा - ट्यूबरकुलिन प्राप्त की, जो तपेदिक बैक्टीरिया की संस्कृति से एक अर्क है। हालाँकि ट्यूबरकुलिन का कोई चिकित्सीय प्रभाव नहीं है, फिर भी इसका उपयोग तपेदिक के निदान के लिए सफलतापूर्वक किया जाता है।

कोच के वैज्ञानिक कार्यों को दुनिया भर में मान्यता मिली और 1905 में उन्हें चिकित्सा में नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया।

कोच द्वारा विकसित विधियों का उपयोग करते हुए, फ्रांसीसी और जर्मन जीवाणुविज्ञानी ने कई बैक्टीरिया, स्पाइरोकेट्स और प्रोटोजोआ की खोज की - मनुष्यों और जानवरों में संक्रामक रोगों के प्रेरक एजेंट। उनमें से प्युलुलेंट और घाव संक्रमण के रोगजनक हैं: स्टेफिलोकोकी, स्ट्रेप्टोकोकी, एनारोबिक संक्रमण के क्लॉस्ट्रिडिया, ई. कोली और आंतों के संक्रमण के रोगजनक (टाइफाइड और पैराटाइफाइड बैक्टीरिया, शिगा पेचिश बैक्टीरिया), रक्त संक्रमण के प्रेरक एजेंट - पुनरावर्ती स्पाइरोकीट बुखार, श्वसन के रोगजनक और कई अन्य संक्रमण, जिनमें प्रोटोजोआ (प्लाज्मोडिया मलेरिया, पेचिश अमीबा, लीशमैनिया) के कारण होने वाले संक्रमण भी शामिल हैं। इस काल को सूक्ष्म जीव विज्ञान का "स्वर्ण युग" कहा जाता है।

सूक्ष्मजैविक विज्ञान के विकास में घरेलू वैज्ञानिकों की भूमिका (आई.आई. मेचनिकोव, डी.आई. इवानोव्स्की, जी.एन. गेब्रीचेव्स्की, एस.एन. विनोग्रैडस्की, वी.डी. टिमाकोव, एन.एफ. गामालेया, एल.ए. ज़िल्बर, पी.एफ. ज़ड्रोडोव्स्की, जेड.वी. एर्मोलेयेवा)।

इम्यूनोलॉजी के संस्थापकों में से एक आई.आई. मेचनिकोव (1845-1916) थे, जो प्रतिरक्षा के फागोसाइटिक या सेलुलर सिद्धांत के निर्माता थे। 1888 में, मेचनिकोव ने पाश्चर का निमंत्रण स्वीकार कर लिया और अपने संस्थान में प्रयोगशाला का नेतृत्व किया। हालाँकि, मेच्निओव ने अपनी मातृभूमि के साथ घनिष्ठ संबंध नहीं तोड़े। उन्होंने कई बार रूस का दौरा किया और कई रूसी डॉक्टरों ने उनकी पेरिस प्रयोगशाला में काम किया। इनमें वाई.यू.बरदाख, वी.ए.बैरीकिन, ए.एम.बेज़्रेडका, एम.वी.वेनबर्ग, जी.एन.गैब्रीचेव्स्की, वी.आई.इसेव, एन.एन.क्लोडनिट्स्की, आई.जी.सवचेंको, एल.ए. तारासेविच, वी.ए. खावकिन, टीएस.वी. त्सिक्लिंस्काया, एफ.या. चिस्टोविच और अन्य शामिल हैं। जिन्होंने घरेलू और विश्व माइक्रोबायोलॉजी, इम्यूनोलॉजी और पैथोलॉजी के विकास में महत्वपूर्ण योगदान दिया।

संक्रामक-विरोधी प्रतिरक्षा बनाने के क्षेत्र में महत्वपूर्ण प्रगति के बावजूद, व्यावहारिक रूप से इसके विकास के तंत्र के बारे में कुछ भी ज्ञात नहीं था। निर्णायक मोड़ आई.आई. की खोज थी। मेचनिकोव (1845-1916), उनके द्वारा 1882 में मेसिना में एक स्टारफिश के लार्वा की प्रतिक्रिया का अध्ययन करते हुए उसमें गुलाब का कांटा डालने पर बनाया गया था। यह वह ख़ुशी का अवसर था जब एक तैयार दिमाग पर एक आकस्मिक अवलोकन पड़ा और आई.आई. मेचनिकोव ने फागोसाइटोसिस, सूजन और सेलुलर प्रतिरक्षा के सिद्धांत के निर्माण के लिए।

1892 में, मेचनिकोव ने अपना काम "सूजन की तुलनात्मक विकृति पर व्याख्यान" प्रकाशित किया, जिसमें, एक उत्कृष्ट विचारक के रूप में, उन्होंने विकासवादी सिद्धांत के दृष्टिकोण से रोग प्रक्रियाओं की जांच की। 1901 में, उनकी नई पुस्तक "इम्युनिटी टू इंफेक्शियस डिजीज" प्रकाशित हुई, जिसमें प्रतिरक्षा के क्षेत्र में कई वर्षों के शोध के परिणामों का सारांश दिया गया।

मेचनिकोव और उनके समर्थकों के बीच हास्य सिद्धांत के अनुयायियों के बीच जो चर्चा हुई, जिसने एंटीबॉडी की क्रिया को प्रतिरक्षा के आधार के रूप में देखा, ने महान रचनात्मक महत्व प्राप्त कर लिया। एंटीबॉडी का अध्ययन 19वीं सदी के आखिरी दशक में पी. एर्लिच और फिर जे. बोर्डेट के काम से शुरू हुआ।

इम्यूनोलॉजी के विकास के साथ-साथ कीमोथेरेपी के निर्माण और विकास में पॉल एर्लिच (1854-1915) का योगदान अमूल्य है। यह वैज्ञानिक सक्रिय और निष्क्रिय प्रतिरक्षा की अवधारणाओं को तैयार करने वाला पहला व्यक्ति था और हास्य प्रतिरक्षा के एक व्यापक सिद्धांत का लेखक था, जिसने एंटीबॉडी की उत्पत्ति और एंटीजन के साथ उनकी बातचीत दोनों को समझाया। सेल रिसेप्टर्स के अस्तित्व के बारे में एर्लिच की भविष्यवाणी जो विशेष रूप से एंटीजन के कुछ समूहों के साथ बातचीत करती है, कई वर्षों से विनाशकारी आलोचना का विषय रही है। हालाँकि, 20वीं सदी के उत्तरार्ध में बर्नेट के सिद्धांत में इसे पुनर्जीवित किया गया और आणविक स्तर पर सार्वभौमिक मान्यता प्राप्त हुई।

आई.आई.मेचनिकोव यह समझने वाले पहले लोगों में से एक थे कि प्रतिरक्षा के विनोदी और फागोसाइटिक सिद्धांत परस्पर अनन्य नहीं हैं, बल्कि केवल एक दूसरे के पूरक हैं। 1908 में, मेचनिकोव और एर्लिच को इम्यूनोलॉजी के क्षेत्र में उनके काम के लिए संयुक्त रूप से नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया था।

एर्लिच की खोजें:

1. मलेरिया के इलाज में मेथिलीन ब्लू का उपयोग

2. ट्रिपैनोसोमा के इलाज के लिए ट्रिपैन रेड का उपयोग

3. साल्वर्सन की खोज (1907)

4. एंटीटॉक्सिक सीरा की गतिविधि निर्धारित करने और एंटीजन-एंटीबॉडी की बातचीत का अध्ययन करने के लिए एक विधि का विकास

5. हास्य प्रतिरक्षा का सिद्धांत।

19वीं सदी का अंत वीरा राज्य की युगांतरकारी खोज द्वारा चिह्नित किया गया था। इस साम्राज्य का पहला प्रतिनिधि तंबाकू मोज़ेक वायरस था, जो तंबाकू के पत्तों को संक्रमित करता है, जिसकी खोज 12 फरवरी, 1892 को सेंट पीटर्सबर्ग विश्वविद्यालय के वनस्पति विज्ञान विभाग के एक कर्मचारी डी.आई. इवानोव्स्की ने की थी, दूसरा पैर और मुंह की बीमारी थी। वायरस, जो घरेलू पशुओं में इसी नाम की बीमारी का कारण बनता है, की खोज 1898 में एफ. लेफ़लर और पी. फ़्रॉस्च ने की थी। हालाँकि, उस समय इन खोजों की सराहना नहीं की जा सकी और जीवाणु विज्ञान की शानदार सफलताओं की पृष्ठभूमि में इन खोजों पर बमुश्किल ध्यान दिया गया।

मॉस्को बैक्टीरियोलॉजिकल स्कूल के प्रमुख और रूसी बैक्टीरियोलॉजिस्ट के नेताओं में से एक जी.एन. गैब्रिचेव्स्की (1860-1907) थे, जिन्होंने 1895 में मॉस्को विश्वविद्यालय में बैक्टीरियोलॉजिकल इंस्टीट्यूट का नेतृत्व किया था, जिसे निजी फंड से खोला गया था। उन्होंने स्कार्लेट ज्वर और पुनरावर्ती ज्वर के विशिष्ट उपचार और रोकथाम के क्षेत्र में काम किया। स्कार्लेट ज्वर की उत्पत्ति के उनके स्ट्रेप्टोकोकल सिद्धांत को अंततः सार्वभौमिक स्वीकृति मिली। गैब्रिचेव्स्की "गाइड टू क्लिनिकल बैक्टीरियोलॉजी फॉर डॉक्टर्स एंड स्टूडेंट्स" (1893) और पाठ्यपुस्तक "मेडिकल बैक्टीरियोलॉजी" के लेखक हैं, जिसके चार संस्करण हुए। जी.एन. गेब्रीचेव्स्की (1860-1907) ने रूस में सेरोथेरेपी की शुरुआत की और पुनरावर्ती बुखार, डिप्थीरिया और स्कार्लेट ज्वर के प्रति प्रतिरक्षा के तंत्र का अध्ययन किया।

पेररबर्ग बैक्टीरियोलॉजिकल स्कूल का मुख्य केंद्र प्रायोगिक चिकित्सा संस्थान था। एस.एन.विनोग्राडस्की, जो सामान्य सूक्ष्म जीव विज्ञान के क्षेत्र में अपने काम के लिए विश्व प्रसिद्ध हुए, को बैक्टीरियोलॉजिकल विभाग का प्रमुख नियुक्त किया गया। उन्होंने वैकल्पिक फसलों की पद्धति का उपयोग कर विकास किया। विनोग्रैडस्की ने सल्फर और लौह बैक्टीरिया, नाइट्रिफाइंग बैक्टीरिया की खोज की - मिट्टी में नाइट्रीकरण प्रक्रिया के प्रेरक एजेंट। उन्होंने कृषि में सूक्ष्मजीवों की भूमिका की स्थापना की।

वी.डी. टिमाकोव (1905-1977) माइकोप्लाज्मा और बैक्टीरिया के एल-रूपों के सिद्धांत के संस्थापकों में से एक हैं, उन्होंने सूक्ष्मजीवों के आनुवंशिकी, बैक्टीरियोफैगी और संक्रामक रोगों की रोकथाम का अध्ययन किया।

1934 में वी.डी. टिमाकोव को टरमेन इंस्टीट्यूट ऑफ माइक्रोबायोलॉजी एंड एपिडेमियोलॉजी में आमंत्रित किया गया, जहां उन्होंने टीके और सीरम के उत्पादन के लिए विभाग का नेतृत्व किया। उस समय गणतंत्र में आंतों में संक्रमण की घटनाएँ अभी भी अधिक थीं। वी.डी. टिमाकोव आंतों के संक्रमण के खिलाफ निवारक दवाओं पर अपनी पीएचडी थीसिस का बचाव कर रहे हैं। युवा वैज्ञानिक तुर्कमेनिस्तान में बैक्टीरियोफेज और फ़िल्टर करने योग्य वायरस पर अपना पहला अध्ययन भी कर रहे हैं।

वी.डी. के नेतृत्व में टिमकोव ने मेडिकल माइक्रोबायोलॉजी के एक नए खंड का निर्माण शुरू किया - बैक्टीरिया और माइकोप्लाज्मा के एल-रूपों का अध्ययन। यह दिशा फ़िल्टरिंग रूपों के अध्ययन की एक तार्किक निरंतरता थी, जिससे वी.डी. टिमकोव ने अपनी वैज्ञानिक गतिविधि शुरू की। संक्रामक रोगों में बैक्टीरिया के एल-रूपों और माइकोप्लाज्मा परिवार की भूमिका को स्पष्ट करने के लिए अध्ययनों की एक श्रृंखला के लिए, वी.डी. टिमाकोव प्रोफेसर जी.वाई.ए. के साथ मिलकर। कगन को 1974 में लेनिन पुरस्कार से सम्मानित किया गया था।
वी.डी. की वैज्ञानिक गतिविधि की मुख्य दिशाओं में से एक। टिमकोवा सूक्ष्मजीवों के आनुवंशिकी के प्रति समर्पित है। वी.डी. टिमाकोव ने चिकित्सकीय रूप से महत्वपूर्ण सूक्ष्मजीवविज्ञानी और महामारी विज्ञान संबंधी समस्याओं को हल करने के लिए आनुवंशिक विश्लेषण का उपयोग करना आवश्यक समझा। और वर्तमान में, इंस्टीट्यूट ऑफ एपिडेमियोलॉजी एंड माइक्रोबायोलॉजी में बैक्टीरिया के आनुवंशिकी पर काम की दिशा मुख्य है। गामालेया. वी.डी. की गतिविधियाँ आनुवंशिकी के पुनर्निर्माण के लिए टिमकोवा के प्रयास केवल अपने स्वयं के शोध के संचालन तक ही सीमित नहीं थे। उन्होंने हमारे देश भर में आनुवंशिकी को फिर से बनाने के लिए बहुत बड़ा काम किया।
अपने काम के प्रति जुनून के अलावा, व्लादिमीर दिमित्रिच को एक स्पष्ट दिमाग, जीवन की समझ और साहस की विशेषता थी। बाद की गुणवत्ता पूरी तरह से वैज्ञानिक-विरोधी "महान" खोजों के खिलाफ उनकी लड़ाई में प्रदर्शित हुई, जैसे कि वे दावा करते थे कि वायरस बैक्टीरिया में बदल सकते हैं।

उत्कृष्ट रूसी सूक्ष्म जीवविज्ञानी एन.एफ.गामालेया (1859-1949), जिन्होंने 1886 में पाश्चर के साथ रेबीज पर काम किया था, मेचनिकोव और बर्दाख के साथ मिलकर रूस में पहला बैक्टीरियोलॉजिकल स्टेशन स्थापित किया, जहां एक एंटी-रेबीज वैक्सीन का उत्पादन किया गया और लोगों को रेबीज के खिलाफ टीका लगाया गया। एन.एफ. गामालेया रेबीज, हैजा और सूक्ष्म जीव विज्ञान और प्रतिरक्षा विज्ञान की अन्य समस्याओं पर समर्पित कई वैज्ञानिक कार्यों के लेखक हैं।

एल.ए. ज़िल्बर (1894-1966) ट्यूमर की उत्पत्ति के वायरल सिद्धांत के संस्थापक हैं, उन्होंने सुदूर पूर्वी टिक-जनित एन्सेफलाइटिस के प्रेरक एजेंट को अलग किया।

ट्यूमर एंटीजन के अध्ययन में प्रगति ने एल.ए. ज़िल्बर को एंटीट्यूमर टीकाकरण का प्रयास करने के लिए प्रेरित किया, जिसे उन्होंने 1950 के आसपास शुरू किया था। दो मॉडलों पर जेड.एल. बैदाकोवा और आर.एम. रैडज़िखोव्स्काया के साथ: खरगोशों में ब्राउन-पियर्स ट्यूमर और चूहों में सहज स्तन कैंसर।

पी.एफ. ZDRODOVSKY (1890-1976) ने रिकेट्सियल रोगों, मलेरिया, ब्रुसेलोसिस और प्रतिरक्षा के नियमन की समस्या से निपटा।

जिनेदा विसारियोनोव्ना एर्मोलेयेवा पहली घरेलू एंटीबायोटिक की निर्माता हैं। वैज्ञानिक और तकनीकी प्रगति की सभी उपलब्धियों में से, एंटीबायोटिक दवाओं और मुख्य रूप से पेनिसिलिन की खोज निस्संदेह लोगों के स्वास्थ्य को संरक्षित करने और उनकी जीवन प्रत्याशा बढ़ाने के लिए सबसे महत्वपूर्ण है। हमारे देश के प्रमुख वैज्ञानिकों में से जिन्होंने चिकित्सा के इस क्षेत्र के विकास में महान योगदान दिया है, प्रमुख स्थानों में से एक सही मायने में पहले घरेलू एंटीबायोटिक के निर्माता, एक उत्कृष्ट सूक्ष्म जीवविज्ञानी, एक प्रतिभाशाली स्वास्थ्य देखभाल आयोजक, एक प्रसिद्ध जनता का है। फिगर, एक अद्भुत शिक्षक, यूएसएसआर एकेडमी ऑफ मेडिकल साइंसेज के शिक्षाविद, आरएसएफएसआर के सम्मानित वैज्ञानिक, यूएसएसआर राज्य पुरस्कार विजेता जिनेदा विसारियोनोव्ना एर्मोलेयेवा। अन्य वैज्ञानिकों के साथ, वह हमारे देश में मेडिकल बैक्टीरियोकैमिस्ट्री और एंटीबायोटिक्स के अध्ययन के मूल में खड़ी थीं, महान संगठनात्मक प्रतिभा और अटूट ऊर्जा की व्यक्ति थीं, जिनके अथक परिश्रम और असाधारण व्यक्तिगत गुणों ने उन्हें सार्वभौमिक सम्मान और मान्यता दिलाई।

जिनेदा विसारियोनोव्ना की वैज्ञानिक गतिविधि का एक महत्वपूर्ण क्षेत्र हैजा का अध्ययन है। हैजा और हैजा जैसे विब्रियोस की आकृति विज्ञान और जीव विज्ञान के गहन, व्यापक अध्ययन के आधार पर, जेड वी एर्मोलेयेवा ने इन सूक्ष्मजीवों के विभेदक निदान के लिए एक नई विधि का प्रस्ताव रखा।

1942 में, ज़ेडवी एर्मोलेयेवा का मोनोग्राफ "हैजा" प्रकाशित हुआ था, जिसमें विब्रियो हैजा के लगभग 20 वर्षों के अध्ययन के परिणामों का सारांश दिया गया था। इस मोनोग्राफ ने हैजा के प्रयोगशाला निदान, उपचार और रोकथाम के लिए नए तरीके प्रदान किए।
जिनेदा विसारियोनोव्ना ने अपने वैज्ञानिक कार्य का एक महत्वपूर्ण हिस्सा जीवाणुरोधी प्रभाव वाले पदार्थों के अलगाव और अध्ययन के लिए समर्पित किया। इस तरह का पहला पदार्थ, जिसे "लाइसोज़ाइम" कहा जाता है, 1929 में जेड.

1960 में, हमारे देश में पहली बार Z.V. एर्मोलेयेवा के नेतृत्व में वैज्ञानिकों के एक समूह को एंटीवायरल ड्रग इंटरफेरॉन प्राप्त हुआ। इस दवा का उपयोग पहली बार 1962 में गंभीर इन्फ्लूएंजा के इलाज के लिए और रोगनिरोधी के रूप में किया गया था। दवा का उपयोग वर्तमान में इन्फ्लूएंजा और अन्य तीव्र श्वसन वायरल संक्रमणों की रोकथाम के साथ-साथ आंख और त्वचा अभ्यास में कई वायरल रोगों के इलाज के लिए किया जाता है।

जिनेदा विसारियोनोव्ना ने अपने जीवन के 30 से अधिक वर्ष (1942-1974) एंटीबायोटिक दवाओं के अध्ययन के लिए समर्पित किए।

ज़ेडवी एर्मोलेयेवा का नाम पहले घरेलू पेनिसिलिन के निर्माण, एंटीबायोटिक्स के विज्ञान के विकास और हमारे देश में उनके व्यापक उपयोग के साथ अटूट रूप से जुड़ा हुआ है। महान देशभक्तिपूर्ण युद्ध की पहली अवधि में घायलों की बड़ी संख्या के कारण घाव के संक्रमण से निपटने के लिए अत्यधिक प्रभावी दवाओं के गहन विकास और चिकित्सा अभ्यास में तत्काल परिचय की आवश्यकता थी। यही वह समय था (1942) जब ऑल-यूनियन इंस्टीट्यूट ऑफ एपिडेमियोलॉजी एंड माइक्रोबायोलॉजी में जेड.वी. एर्मोलेयेवा और उनके सहयोगियों ने पेनिसिलिन का एक सक्रिय उत्पादक पाया और पहले घरेलू पेनिसिलिन - क्रस्टोसिन को अलग किया। 1943 में ही, प्रयोगशाला ने नैदानिक ​​​​परीक्षणों के लिए पेनिसिलिन तैयार करना शुरू कर दिया था।

बाद में, जेडवी एर्मोलेयेवा के नेतृत्व में, कई नए एंटीबायोटिक्स और उनके खुराक रूपों को बनाया गया और उत्पादन में पेश किया गया, जिनमें एक्मोलिन, एक्मोनोवोसिलिन, बिसिलिन, स्ट्रेप्टोमाइसिन, टेट्रासाइक्लिन शामिल हैं; संयोजन एंटीबायोटिक तैयारी (डिपासफेन, एरीसाइक्लिन, आदि)। इस बात पर जोर दिया जाना चाहिए कि जिनेदा विसारियोनोव्ना ने हमारे देश में एंटीबायोटिक दवाओं के औद्योगिक उत्पादन के आयोजन में हमेशा सक्रिय रूप से भाग लिया है।